J Clin Invest：揭示USP9X去泛素本土化ALDH1A3并维持GCSs的间充质特性

胶质母酵素瘤（GBM）是最常见和破坏持续性的人脑恶持续性，其特性在于较广的内异质持续性。尽管值得注意在多模式疗法方面赢得了进展，但GBM症状的结果仍然感到内疚。GBM拥有一个酵素亚群，称为GBM干酵素（GSCs），有着自我更换活持续性和多向分立体化潜能以及起始能力也。因此，迫切需要探索针对GSC的新疗法策略。并且，醛脱氢酶（ALDH）超家族还包括19种酶，它们将内源和小立体化学键醛代谢变成适当的羧酸。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，作准备人体酵素的各种生理反复。越来越多的证据指出，ALDH1A3在白血病干酵素（CSCs）中会展现造出高活持续性，并影响这些酵素内的各种生一物学特性。在GBM中会，已断定ALDH1A3作为延续间充质（MES）GSC的自我更换和致瘤持续性的这两项立体化学键。然而，MES GSCs中会ALDH1A3失调的选择性仍然是神秘的。2019年4月8日，南京医科大学第一附属医院王慧博设计团队等人在The Journal of Clinical Investigation上发表篇文章“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的文章，断定USP9X是一种真正的DUB，可抑制ALDH1A3多脯氨酸立体化和稳定立体化。并且，USP9X是预测ALDH1A3hi MES GSCs富集的这两项立体化学键，是MES GSCs自我更换和致瘤持续性所必需的。同时还评估了USP9X抑制对症状举例的MES GSC梦魇超级任天堂模型的潜在治果。为了明确ALDH1A3酵素内是否被脯氨酸 - 酵素内酶体系统（UPS）翻译后遏制，数据分析医护人员首先用作放线菌酮（CHX）阻断酵素内质从头合变成并HEK293T酵素和普通人星形胶质酵素（NHAs）中会的ALDH1A3酵素内质程度。无论如何，ALDH1A3在CHX处理的8小时内日益交联并大部分测定足足。此外，用酵素内酶体抗病毒MG-132处理酵素导致ALDH1A3酵素内程度非同着增高。这些数据指出ALDH1A3通过UPS交联。在此之后，数据分析医护人员寻求鉴别负责ALDH1A3稳定立体化的潜在DUB，并用作基因表达HEK293T酵素中会的98DUB的siGENOMERTF文库透过RNAi配对。该数据分析初始配对鉴别了与ALDH1A3表示就其的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293酵素中会的ALDH1A3共表示时，断定只有USP9X能够与内源持续性ALDH1A3直接交互作用，从而说明了USP9X是遏制ALDH1A3稳定持续性的非同着候选一物。为了测试这一点，将Flag标记的WT USP9X或裂解失活的基因突变C1566A USP9X（在裂解糖蛋白的一个这两项半胱氨酸中会运载点突变）转染到HEK293T酵素中会。 WT USP9X而非C1566A基因突变的表示以剂量依赖持续性方式则增高ALDH1A3酵素内程度，指出USP9X以依赖于其DUB活持续性的方式则抑制ALDH1A3。胶质母酵素瘤（GBM）干酵素（GSC）的间充质（MES）共通点推选癌酵素亚群，其因其持续持续性侵袭持续性和对正因如此疗法的抗持续性而颇受欢迎。值得注意已提造出醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为延续GSC的MES特性的这两项这两项因素。然而，全力支持异常ALDH1A3表示的选择性仍然难以捉摸。在该数据分析中会，数据分析医护人员断定脯氨酸特异持续性酵素内酶9X（USP9X）是MES GSC中会ALDH1A3的真正去脯氨酸立体化酶。 USP9X与ALDH1A3交互作用，解聚并稳定立体化。此外，数据分析得出FACS分选的USP9Xhi酵素富集有着高ALDH1A3活持续性和有效地致瘤能力也的MES GSC。USP9X的能量消耗非同着下调ALDH1A3，导致MES GSC的自我更换和致瘤能力也的失去，这可以通过ALDH1A3的异位表示得到很大层面的挽救。此外，数据分析医护人员还非同然USP9X抗病毒WP1130正向ALDH1A3交联并且在MES GSC衍生的原位梦魇超级任天堂模型中会非同示造出非同着的疗法功效。另外，USP9X与原发持续性人GBM探针中会的ALDH1A3表示抗拒就其，并且对于有着MES亚组的症状有着结节病价值。总的来说，数据分析结果阐释了USP9X作为ALDH1A3酵素内稳定立体化的这两项去脯氨酸立体化酶和GSC定向疗法的潜在靶点。早期造出处：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019